受激發(fā)射耗盡顯微鏡又稱受激發(fā)射損耗顯微鏡，簡稱STED顯微鏡，是一種基于熒光共聚焦成像的超高分辨率技術。STED顯微鏡超越了光學顯微鏡的傳統(tǒng)限制，可以實現(xiàn)納米級別的高分辨成像，分辨率可達分子大小。
　　STED顯微鏡基本原理是采用兩束中心重合的激光照射樣品，使中心區(qū)域的熒光分子自發(fā)輻射熒光，以壓縮PSF尺寸，從而獲得超衍射極限的熒光發(fā)光點。STED顯微鏡用標記材料包括熒光染料、熒光蛋白、熒光探針等，包括NBD-X、Alexa 488、iRFP、mNeptune2等。
　　STED顯微鏡是在共聚焦顯微鏡的基礎上改造而來，主要由激發(fā)光路、探測光路、損耗光路三條光路組成的，其中激發(fā)光路用于激發(fā)樣本熒光標記，探測光路用于探測收集輻射熒光，損耗光路用于提供中心處強度為零的環(huán)形損耗光束。激發(fā)光路、探測光路、損耗光路均會受到樣本像差的影響，在三條光路中，損耗光束的像差對STED顯微鏡的分辨率、成像質量影響最大。
　　STED顯微鏡搭建理論于1994年提出，經(jīng)過30年的發(fā)展，STED顯微鏡逐漸從從單色STED顯微鏡發(fā)展為多色STED顯微鏡，與此同時，自適應光學（AO）技術的引入、標記技術的發(fā)展，使得STED顯微鏡在高分辨成像、成像維度等方面也取得了顯著的進展。
　　STED顯微鏡是超高分辨率顯微鏡的代表之一，具有超高分辨率成像、光毒性較低、光漂白性較低等特點，適用于長時間觀察活體樣本，在活細胞成像、多熒光標記、生物醫(yī)學研究、材料科學、神經(jīng)科學等領域應用空間廣闊。
　　全球范圍內，STED顯微鏡相關企業(yè)包括Abberior公司、德國蔡司、中國科學院蘇州生物醫(yī)學工程技術研究所、杭州柏納光電有限公司等。我國超分辨光學顯微鏡市場由國外企業(yè)壟斷，但在國產(chǎn)替代背景下，我國企業(yè)在該領域取得了多項成果，如中國科學院蘇州生物醫(yī)學工程技術研究所已經(jīng)研制出雙光子顯微鏡、STED超分辨顯微鏡、雙光子-STED顯微鏡等超分辨光學顯微鏡。
    STED顯微鏡是超高分辨率顯微鏡代表之一，在細胞生物學、神經(jīng)科學、材料科學等領域應用廣泛，隨著市場對樣本可觀察的分子尺度要求提升，STED顯微鏡應用空間將持續(xù)擴大。近年來，STED顯微鏡技術及應用得到了長足發(fā)展，但其也存在成本高、樣品要求高、操作難度較大等問題，一定情況下限制了其應用擴展。